加长超声波破碎仪的提取方法
1.样品准备
组织处理:将清洗后的组织用搅切机切碎成小块,混悬在至少两倍体积的缓冲液中。
细胞处理:洗去培养液的细胞,混悬在至少两倍体积的缓冲液中。
浓度与体积控制:过高浓度的样品可能导致超声波传递效率降低,需适当稀释,并确保样品均匀分散。
2.超声破碎操作
探头操作:将超声探头没入混悬液内,避免直接接触容器底部或侧壁。
参数设置:总超声时间约2分钟,分为4个周期(如4×30秒),周期之间需将样品置于冰浴中冷却,防止过热。
功率与频率:根据样品特性选择合适的超声波频率和功率,初次使用建议从低功率开始,逐步调整至最佳参数。
3.冷却与安全
温度控制:超声处理过程中会产生热量,需配合冰水浴或冷却装置,确保样品温度稳定。
防护措施:操作时佩戴耳塞或耳罩,防止高强度噪音损伤听力;避免液体飞溅,防止样品污染或操作人员受伤。
4.后续处理
离心与分离:超声破碎后,通过离心分离细胞碎片和上清液,提取目标成分。
重复提取:根据实验需求,可重复超声破碎步骤,提高提取效率。
加长超声波破碎仪的提取原理
1.空化效应
超声波在液体中传播时,产生压力变化,形成微小气泡。这些气泡在声波作用下快速膨胀与收缩,最终在临界点瞬间崩溃,释放巨大能量,形成冲击波和微激波,对细胞壁施加强烈剪切力,导致细胞破裂。
2.机械效应
超声波的机械振动使液体介质中的物质质点产生高频震动,增强物质扩散和传播。辐射压强沿声波方向传播,对物料产生破坏作用,使细胞组织变形,蛋白质变性,促进细胞内容物释放。
3.热效应
超声波在液体中传播时,能量被物质质点吸收并转化为热量,导致局部温度升高。这种瞬时升温可加速细胞内成分的溶解,但需通过冷却措施控制温度,防止目标成分失活。
4.微环境效应
超声波在微环境内产生湍动、微扰、界面和聚能等额外效应,扩大物质分子运动速率和穿透力,提高目标成分从固相到液相的传质速率。
应用与优势
高效提取:超声波破碎仪可快速破碎细胞,释放高纯度、高活性的蛋白质、多肽等生物分子,提取效率是传统方法的10倍以上。
广泛适用性:适用于动植物组织、细胞、细菌、病毒孢子等生物样本的破碎,以及乳化、分离、分散、匀化、提取等操作。
灵活调控:超声时间、功率连续可调,支持创建并储存多达20组操作程序,满足不同实验需求。